济南免疫亲和柱的原理和使用注意事项

更新时间：2020-06-27

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　　济南免疫亲和柱是利用免疫亲和层析原理即利用生物大分子具有对某一类生物大分子特异识别和可逆结合的特性而制成，用以分析检测抗体或抗原的亲和层析柱。

　　原理：

　　测定的基础是抗原抗体反应，抗体连接在柱体内，样品经过提取、稀释后，缓慢的通过己烯雌酚三合一免疫亲和柱，在免疫亲和柱内抗体与样本中的雌酚类结合，之后洗涤免疫亲和柱去除没有被结合的杂质。然后用洗脱液洗脱雌酚类，洗脱产物用合适的分析仪器进行检测。

　　济南免疫亲和柱使用注意事项：

　　1、上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高；

　　2、若样品为复杂样品，例如高蛋白、高油脂、酸性样品，可以将提取液分两次提取样品，可以提高提取效果；

　　3、样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀，约每秒1-2滴；

　　4、抗原抗体发生反应的较佳温度是在25℃左右，实验需要的环境温度较好是室温24℃-28℃，太高或太低的温度都会对亲和柱的回收率有一定的影响。在使用前需要恢复至室温再进行实验；

　　5、不要在无水状态下，琼脂容易干燥萎缩，影响亲和柱的质量；

　　6、亲和柱储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温，因为缓冲液冻结，会严重影响亲和柱内的物理结构，对亲和柱的质量影响很大；

　　7、洗脱一般选择试剂甲醇，为增强洗脱效果可加大甲醇体积；

　　8、样液免疫亲和柱净化后，洗脱液过0.45um或更小孔径滤膜效果更好。